氣質(zhì)聯(lián)用（GC-MS）技術(shù)結(jié)合了氣相色譜（GC）強大的分離能力和質(zhì)譜（MS）的定性定量能力，用于檢測 G / 香草醛 / 香蘭素。其原理是：樣品中的 G / 香草醛 / 香蘭素在氣相色譜柱中，根據(jù)各組分在固定相和流動相（載氣）之間的分配系數(shù)差異實現(xiàn)分離，按一定順序依次流出色譜柱。隨后，分離后的組分進(jìn)入質(zhì)譜儀，在離子源中被電離成帶電離子，這些離子經(jīng)質(zhì)量分析器按質(zhì)荷比（m/z）不同進(jìn)行分離，檢測器記錄離子的相對強度，形成質(zhì)譜圖。

通過將樣品的質(zhì)譜圖與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的質(zhì)譜圖或質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫中的圖譜進(jìn)行比對，可實現(xiàn)對 G / 香草醛 / 香蘭素的定性分析；同時，根據(jù)其特征離子的峰面積與濃度的線性關(guān)系（外標(biāo)法），可完成定量分析。

儀器與試劑

（一）儀器

氣相色譜 - 質(zhì)譜聯(lián)用儀（GC-MS）：配備分流 / 不分流進(jìn)樣口、毛細(xì)管色譜柱（如 DB-5MS，30m×0.25mm×0.25μm）、電子轟擊離子源（EI）、質(zhì)量分析器（如四極桿）。

天平：精度為 0.0001g。

超聲波提取儀。

高速離心機（轉(zhuǎn)速≥10000r/min）。

氮吹儀。

移液器（10μL、100μL、1mL 等）。

容量瓶（1mL、10mL、50mL、100mL 等）。

離心管（10mL、50mL）。

微孔濾膜（0.22μm，有機相）。

進(jìn)樣瓶（2mL，帶硅膠墊）。

（二）試劑

G / 香草醛 / 香蘭素標(biāo)準(zhǔn)品：純度≥98%。

正己烷：色譜純。

乙酸乙酯：色譜純。

甲醇：色譜純。

無水硫酸鈉：分析純，經(jīng) 650℃灼燒 4h，冷卻后備用。

超純水：由 Milli-Q 系統(tǒng)制備。

標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

儲備液的配制：分別準(zhǔn)確稱取一定量的 G、香草醛、香蘭素標(biāo)準(zhǔn)品，用甲醇溶解并定容至 100mL 容量瓶中，配制成濃度為 1.0mg/mL 的單標(biāo)儲備液，置于 - 20℃冰箱中避光保存，有效期為 6 個月。

混合中間液的配制：分別準(zhǔn)確移取 1.0mL 上述各單標(biāo)儲備液于 100mL 容量瓶中，用甲醇稀釋定容，配制成濃度為 10μg/mL 的混合中間液，置于 4℃冰箱中避光保存，有效期為 1 個月。

工作標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：分別準(zhǔn)確移取 0.1mL、0.5mL、1.0mL、5.0mL、10.0mL 混合中間液于 10mL 容量瓶中，用正己烷 - 乙酸乙酯（體積比 9:1）混合溶液稀釋定容，配制成濃度為 0.1μg/mL、0.5μg/mL、1.0μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL 的系列工作標(biāo)準(zhǔn)溶液，現(xiàn)配現(xiàn)用。

樣品處理

樣品采集與保存：根據(jù)檢測對象（如食品、植物提取物、香料等）采集具有代表性的樣品，置于潔凈容器中，-20℃冰箱中保存，避免成分揮發(fā)或降解。

樣品提?。悍Q取 5.0g 樣品于 50mL 離心管中，加入 10mL 正己烷 - 乙酸乙酯（體積比 9:1）混合提取液，渦旋混合 2min，超聲提取 20min（功率 250W，溫度 30℃）。

凈化：向提取液中加入 2g 無水硫酸鈉，渦旋 1min，靜置 5min，以 10000r/min 離心 10min，取上清液于另一離心管中。

重復(fù)提?。合驓堅性偌尤?8mL 上述混合提取液，重復(fù)提取、凈化步驟，合并兩次上清液。

濃縮：將合并的上清液轉(zhuǎn)移至氮吹管中，用氮吹儀在 40℃下吹至近干，加入 1mL 正己烷 - 乙酸乙酯（體積比 9:1）混合溶液復(fù)溶，渦旋混合 1min。

過濾：將復(fù)溶后的溶液通過 0.22μm 有機相微孔濾膜過濾，濾液收集于 2mL 進(jìn)樣瓶中，待測。

GC-MS 檢測條件

（一）氣相色譜條件

色譜柱：DB-5MS 毛細(xì)管柱（30m×0.25mm×0.25μm）。

進(jìn)樣口溫度：250℃。

載氣：氦氣（純度≥99.999%），流速 1.0mL/min（恒流模式）。

進(jìn)樣方式：分流進(jìn)樣，分流比 10:1。

進(jìn)樣量：1μL。

柱溫程序：初始溫度 60℃，保持 1min；以 10℃/min 升溫至 200℃，保持 2min；再以 20℃/min 升溫至 280℃，保持 5min。

（二）質(zhì)譜條件

離子源：電子轟擊離子源（EI），電子能量 70eV。

離子源溫度：230℃。

接口溫度：280℃。

質(zhì)量掃描范圍：m/z 50-500。

溶劑延遲：3min。

檢測模式：選擇離子監(jiān)測（SIM），G、香草醛、香蘭素的特征離子（定量離子 / 定性離子）分別為 [具體離子 1]/[具體離子 2, 具體離子 3]、[具體離子 4]/[具體離子 5, 具體離子 6]、[具體離子 7]/[具體離子 8, 具體離子 9]（需根據(jù)實際標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)譜圖確定）。

測定步驟

儀器預(yù)熱：開啟 GC-MS 儀器，進(jìn)行預(yù)熱，待儀器真空度、溫度等參數(shù)達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)（通常需 30-60min）。

標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：按照濃度由低到高的順序，依次將系列工作標(biāo)準(zhǔn)溶液注入 GC-MS 儀器中，每個濃度重復(fù)進(jìn)樣 3 次，記錄各目標(biāo)物定量離子的峰面積。以工作標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，平均峰面積為縱坐標(biāo)，分別繪制 G、香草醛、香蘭素的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

樣品測定：將處理好的樣品溶液注入 GC-MS 儀器中，按照上述檢測條件進(jìn)行測定，記錄各目標(biāo)物定量離子的峰面積。每個樣品重復(fù)進(jìn)樣 3 次，取平均峰面積。